10
odpowiadających ilości 900, 1500 i 2100 ng/pasmo (zawartości L-hioscyjaminy i skopolaminy
w próbach wyznaczono na podstawie krzywej kalibracyjnej). Dla każdego stężenia wykonano 3 próby
(łącznie 9). Wynik wyrażono jako średni odzysk ± odchylenie standardowe.
3.8. Analiza α-solaniny w owocach goji z wykorzystaniem chromatografii cienkowarstwowej (TLC)
3.8.1. Płytki chromatograficzne
W analizie chromatograficznej zastosowano płytki szklane pokryte żelem krzemionkowym
(TLC Silica gel 60 F₂₅₄, Merck, Darmstadt, Niemcy) o rozmiarach 20 x 10 cm. Przed zastosowaniem
płytki chromatograficzne odmywano dwukrotnie fazą ruchomą o składzie chloroform : metanol (1:1
v/v). Fazę ruchomą odparowywano, z płytek, strumieniem ciepłego powietrza, przez 15 minut.
3.8.2. Aplikacja próbek
Analizowane próbki roślinne oraz roztwory wzorca nanoszono na płytki chromatograficzne
za pomocą aplikatora AS 30 firmy Desaga (Niemcy) wg poniższych parametrów:
- odległość linii startowej od dołu płytki: 10 mm
- szerokość pasma: 6 mm
- odległości pomiędzy środkami pasm: 10 mm
- objętość strzykawki dozującej: 10 μl
- dozowana objętość próby: 10 μl
- prędkość dozowania: 3 s/μl
- gaz nośny: sprężone powietrze
3.8.3. Warunki rozdzielania
Rozdzielenie chromatograficzne prowadzono w dwukorytkowych pionowych komorach
chromatograficznych (Twin Trough Chamber 20 x 10 cm, Camag, Muttenz, Szwajcaria)
w temperaturze 21
o
C, na drodze 85 mm.
W analizach stosowano fazę ruchomą o składzie: chloroform : metanol : woda : 25% amoniak (70 : 30
: 4 : 2 v/v/v/v).
Rozdzielenie chromatograficzne prowadzono dwuetapowo: