5 

 

Roztarty materiał roślinny odważono w ilości 2,5 g do szklanej zlewki Philipsa poj. 100 ml i zalano 25 

ml 0,5 M H

2

SO

4

. Ekstrakcję prowadzono przez 30 min., na mieszadle magnetycznym RT5 firmy IKA-

Werke, Niemcy (300 rpm), w temperaturze pokojowej (21

o

C). Uzyskany wyciąg przesączono, pod 

zmniejszonym ciśnieniem, przez sączek ze szkła spiekanego G1, a zlewkę i sączek przemyto 

dodatkowo 25 ml 0,5 M H

2

SO

4

. Połączone przesącze przeniesiono do suchej zlewki Philipsa poj. 100 

ml, do której dołączono pozostałość z kolby ssawkowej przepłukanej 25 ml 0,5 M H

2

SO

4

. Odczyn pH  

otrzymanego wyciągu doprowadzono do wartości 9,0 przy użyciu 25% NH

4

OH (pehametr Eutech 

alpha-pH800, Cole-Parmer, USA). Powyższy ekstrakt przeniesiono ilościowo do rozdzielacza 

i wytrząsano trzema porcjami chloroformu (3 x 100 ml). Połączone wyciągi chloroformowe 

umieszczono w szklanej, 1000 ml kolbie destylacyjnej i zagęszczono pod zmniejszonym ciśnieniem do 

objętości ok. 1 ml (wyparka Unipan typ 350). Zagęszczony ekstrakt przeniesiono ilościowo do fiolki 

szklanej pojemności 7 ml, popłukując kolbę destylacyjną mieszaniną chloroform : metanol 1:1 v/v. 

Zawartość fiolki odparowano do sucha w strumieniu azotu. Do otrzymanego osadu dodano 0,5 ml 

mieszaniny chloroform-metanol 1:1 v/v, a następnie fiolkę umieszczono w łaźni ultradźwiękowej na 5 

min. Powstałą zawiesinę przeniesiono do probówki Eppendorfa i odwirowano w wirówce MPW-65R 

firmy MPW.MED.INSTRUMENTS Spółdzielnia Pracy, Polska (14000 rpm, 10 min.). Osad nie 

zawierający badanych metabolitów odrzucono zaś supernatant przeznaczono do dalszych badań 

chromatograficznych. 

 

 

3.4.2. Przygotowanie próby do analizy α-solaniny (ekstrakcja oraz oczyszczanie) 

Roztarty materiał roślinny odważono w ilości 2,5 g do zlewki Philipsa poj. 100 ml. Ekstrakcję 

prowadzono na mieszadle magnetycznym RT5 firmy IKA-Werke, Niemcy (300 rpm) w temperaturze 

pokojowej (21

o

C). Wstępnie, surowiec ekstrahowano z 20 ml metanolu przez 5 minut do uzyskania 

jednolitej zawiesiny. Do zawiesiny dodawano 40 ml chloroformu i prowadzono dalszą ekstrakcję 

(21

o

C) przez 30 minut. Ekstrakt sączono przez sączek ze szkła spiekanego G1. Przesącz zagęszczano do 

około 1 ml pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka Unipan typ 350, Polska). Pozostałość przenoszono 

ilościowo w metanolu do szklanej, 10 ml kolby miarowej i uzupełniano  do kreski powyższym 

rozpuszczalnikiem. Do analizy pobierano 2 ml ekstraktu, który przenoszono do probówki Eppendorfa 

i odwirowywano w wirówce MPW-65R firmy MPW.MED.INSTRUMENTS Spółdzielnia Pracy, Polska 

(14000 rpm, 10 min.). Osad  nie zawierający glikoalkaloidów odrzucano, a supernatant przeznaczono 

do dalszych badań chromatograficznych.